冗余冻存试剂开发持续模式，试剂+温度监控设备长期评测
主 传统技术优化，DMSO+血清
次 新品开发思路可行性：玻璃化干细胞冻存复苏应用，临床样本冻存复苏目的数据统计，
冻存复苏各种问题统计

试剂部分
传统成分：丙三醇、二甲基纤维素（DMSO) 聚乙烯吡咯烷酮( pvp) 聚乙二醇(PEG) 羟乙基淀粉(HES)
辅助：胶原 透明质酸钠 硫辛酸 谷二肽 环二肽 甘露聚糖 氯化钠 海藻糖
培养基成分添加
重组人血清白蛋白、复合抗氧化剂、抗菌剂、缓冲液、注射用水
L-异亮氨酸、L-异亮氨 、L-亮氨酸、L-醋酸赖氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸、L-丙氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、、亚硫酸氢钠、
生物材料冷冻保存相关技术咨询
推荐统计细胞(对冻存复苏较挑剔细胞系，及工业应用细胞)痛点问题可讨论
施万 造血原代，原代免疫（NK、γδ-T、PBMC）iPSC冻存液、干细胞、原代自建\肝细胞原代，
系L5178Y HL-60 A549 MDCK ,二倍体工程细胞
工业配套验证，以备份方式或目前实验效果不理想案例，棘手痛点问题
马立克疫苗生产应用讨论
类器官，组织块，人造肉（单个细胞，成小团细胞）验证，外泌体培养特殊要求超量培养
肝细胞原代-临床样本研究
临床免疫细胞冻存复苏（含血清建系目的）
临床医疗样本库组织工程研究研究

国内建系细胞，技术部分全部共享
可共享原代已有技术评测
物种保护：畜牧育种、良种保护
延展应用：生物制药，基因工程，细胞培养，细胞工程，实验动物 重组蛋白，动物保健，基因工程，样本库，疫苗开发 生物

冻存复苏是国内细胞建系关键步骤，难点细胞统计意义积极。
各种冻存复苏痛点问题都可讨论。各种难养，成团成片等各种特点细胞技术储备足。北京，天津，可面谈讨论。
相关技术老师有兴趣可参与，加我微信。这次冻存复苏统计涉及的冷藏技术，工业工程类技术，较多。
有相关例在应用，我们可给些备份方案，国内种子库我司也可参与备份体系验证等，路过大牛老师如果深入研究统计过，可讨论共同验证，及灵活的合作方式。

数据统计内容
冻存瓶控温探针数据统计，安瓿瓶温度探针，
电解质培养前，复苏后，影响电解质检测
检测控冰技术

合作参与
制冷设备研发生产商-控冰检测设备基础数据统计。
上述试剂，设备生产厂家路过，可给我司留言，有兴趣参与研发都没问题。有兴趣老师课题组，要有兴趣欢迎参与，

细工方案要点提示：①冻存前胰酶处理（细工胰酶经过胰酶敏感细胞测试，提高活率关键步骤，这部验证成功，还可用到转染前细胞质量提升，大大增加转然后成功率，其他救助办法这里不展开，有需要可来信讨论）。②高质量血清，这部分验证成功，后面种子库试剂，正规库来源细胞救助，试验后死细胞过多，细工是通过免疫细胞，巨噬分化比较了不少厂家。实验涉及到分化影响可发试用比较。③促贴壁：特别是上皮类，这类包括很多难养系大部分是上皮类、腺与神经、免疫类特点都包含得系，特点是容易成球，成球速度比贴壁速度要快，我们持续统计这类问题解决目的是建系，和规模培养为后续超量培养，维持培养做些技术储备。目前有些小进展，涉及方法太多，这类先不阐述，有兴趣用户可来信讨论。

冻存复苏是国内细胞建系关键步骤，难点细胞统计意义积极。

各种冻存复苏痛点问题都可讨论。各种难养，成团成片等各种特点细胞技术储备足。北京，天津，可面谈讨论。
相关技术老师有兴趣可参与，加我微信。这次冻存复苏统计涉及的冷藏技术，工业工程类技术，较多。
有相关例在应用，我们可给些备份方案，国内种子库我司也可参与备份体系验证等，路过大牛老师如果深入研究统计过，可讨论共同验证，及灵活的合作方式。
细工合作优势，对产品开发，验证周期长，纯国内技术与生产。

成熟产品

自动化相关优势介绍
冻存救助辅助首推
增强贴壁试剂 https://www.bioon.com.cn/product/87a325940116b
七年相关技术储备，救助原代案例多，可做备份方案，该试剂评测后，您公司要有国外疫苗生产用户，建议推荐。提高产能能到预想目标，
细胞产物出口型公司，产物去除支原体，细工方案可参考，简单易行。该产品出口合作，人才技术储备，实验验证。自动化二倍体生产优势大，如有意向从案例细胞（我司提供）完成预实验高滴度目标蛋白生产，预算足，可到中式（合作方式灵活）通过预实验了解实验室到中式所有问题难点。需配套我们胰酶
种子库更新（精筛，粗筛）：精筛细工单克隆给出简单易行方法，国内建系优化应用（提升增殖速度）粗筛简单阐述资料发您自己重复，建系目的配合无外力影响，先筛到目的细胞，在建系，大大提升建系率，需内容形成可行性资料的，具体问题具体分析。
冗余理念提出，都是为建系目的，解决痛点难点，为建系做充足技术储备
自动化相关配套相关链接，冗余理念在2017年增强贴壁试剂开发出来，就开始总结优化工业用途相关应用了。
优化胰酶保种推荐，珍贵株推荐，自动化推荐） https://www.bioon.com.cn/product/cb5bb46316356 优势验证时间长，细胞多。胰酶敏感细胞链接里有统计历程介绍。
上述两款产品在自动化培养细工优势，统一标准（试剂耗材)后，我司提供案例细胞，实验室阶段完成高滴度蛋白生产可观的效价后，用户详细了解冗余关键点，生产中与用户说明痛点解决理由，二倍体生产用户做到交钥匙阶段。无BUG.其他工业应用用户可讨论通点。

合作开发中产品
前期细胞培养，转染，冻存问题统计优势明显，应用目的明确
培养过程添加解离配套试剂 ， 验证案例不多，可免费预实验，也可用前，把目的沟通清楚，给出参考建议
冻存复苏全套试剂(基于传统方案），
种子库更优冻存条件参考，备份方案之一
种子库冻存复苏链接 ，冻存复苏全套试剂(基于传统方案）推荐理由
冻存难点痛点目前统计介绍现状，及更多需求可讨论细节。工业验证需长时间反复验证，建议备份组
种子库应用：冻存复苏，转染前细胞质量优化，胰酶敏感细胞等更多需求及验证一直会统计下去

例如：以下问题到无解无文献无支撑等难点痛点都可以讨论。（细工为国内建系，超量培养，维持培养做些技术储备目的）
讨论上述对细胞冻存细胞平时验证推荐，讨论理由，就是冻存前消化成单个，胰酶敏感重要性，这个我们总结有，巨噬系，原代，免疫系，肝类、原代，胰岛胰腺，上皮，腺类，腺类神经类共存系，淋巴类SV40,hTERT
THP-1,正常细胞系。生长特性：成团成片，堆叠生长。（试剂耗材种子库理念一致，要找到复苏活率稳平，多年长时间验证）
这步解决好了，在用经典冻存（经典一定要自己预实验为准），建议做到理想效率是，不管是那种细胞（，活率都在80%以上
配合自动化应用，冗余优势凸显，
种子库更新优化，单克隆建议细工POTOCOL,适合杂交瘤融合后单克隆、工程株、稳转株、耐药株、重要实验克隆株筛选、成瘤不稳定株克隆筛选、准株筛选（老手适合）
以下问题困扰实验并不顺利，配合我司胰酶配套。
成团成片，转染效率不高（悬浮免疫，原代请注明）堆叠式生长（类似类器官），原代首代传代后消化不下来（该问题简单解决是，在培养瓶用前铺曾血清）高级解决来信告知详情，给出参考建议。-自2017
为更优质精准服务用户，所用试剂耗材，厂家，货号，操作步骤，预期要求告知。
可用复苏活率不高细胞验证，原代，细胞系都可以，告知细胞名称，生长特性，以前冻存方法，活率多少（是否含血清），目的要求，目前原代PBMC案例活率90%,三年统计数据，案例很稳定。
您建系，我全程陪同，总觉得冻存复苏这个很重要。

实验室阶段统计，就常规痛点问题，黑点、生长慢，消化不下来，成瘤不稳，都可深入套路，细工方案实施。
胰酶敏感细胞整体统计，原代离体处理，建系活率保证（无外力，化学，机械），结合十年难养系问题统计，肝，乳腺，胰岛胰腺，免疫悬浮，淋巴瘤。

就工业，自动化等，开发相关冗余试剂（容错能力要强，可行性高，培养体系运行平稳。自动化细胞反向细胞驯化，贴壁驯化成悬浮，悬浮驯化成贴壁。悬浮驯化成贴壁技术储备充足。细胞工厂含血清优势，完全控制细胞（长、停、维持）成本低，不用添加昂贵的设备，试剂等，培养房改造容易，目前进口培养箱生产商没有超大培养箱，问题可讨论，案例还不能公开。已运行。要能深入合作，我们可配合完成细胞产物上游工艺开发，目前是因子，单抗，ADC,基质胶生产等项目。

这类生产要有国外用户生产商，试用可随时验证，目前无替代品（胶原，基质胶，粘连蛋白，明胶等）

国产培养体系备份体系技术生产储备。
国内二倍体系问题统计
乳腺难养系统计
肝难养系，原代问题统计
胰岛胰腺系，原代问题统计
国内库成纤维系列，（有细胞列表）
国内库腺类系列，（有细胞列表）
单细胞，普遍状态差，
PDX成瘤难，细胞培养阶段质量提升
类器官：前言问题，及细工方案参考
人造肉相关，维持培养基，方法，可行性。
后面国内建系是细工常年统计与目标方向。人才储备，技术储备，

细工上述产品开发目的，都是为纯国内技术，试剂建系，目前已开始肝，胰岛胰腺原代株建系合作，细工验证方式每个地区五家以上实验室，前期痛点难点讨论，可行方案后，同步验证，工厂拿走成熟方案，实验拿走文章，我们统计总结相关产品开发，并通过该合作，给药厂做些人才提前储备（每年毕业生这莫多），共享方案来自特斯拉技术共享，电车占有一席之地，要不共享，特斯拉自己需要500年，才能站住脚。

长期统计与应用先行
生产及培养特殊要求问题讨论 可讨论沟通问题邮件题目，业务介绍
缺氧细胞培养相关讨论-冗余试剂开发参考-细工生物20220903-----后期高海拔细胞相关生产工艺开发，昆明，青海，西藏
噬斑工业应用案例参考痛点讨论(共生病毒分离应用）-细工生物20240311---难分离病毒参考，目前进展鸽病毒单种分离取得了满意效果。
样本库组织到细胞建系目的-冻存复苏中温度监控测量技术咨询-细工生物20240902---复苏细胞是国内建系后期面临的比较重要管卡，细工目前通过种子库案例，问题统计，与现状备份方案推广
单克隆简易方法难点痛点讨论-细工生物20240701---通过简单可行单克隆，优化种子库，后期国内建系细胞培养优化比较可行方案提前技术储备。
类细胞-首代培养-成球后提高增殖速度为主要讨论 （建系保种推荐）--类器官，人造肉，外泌体最近比较热点，细工观点建议参考（来自两年多问题统计后，给出细工方向可行性建议）
细胞冻存复苏全套试剂(基于传统方案，种子库）-细工生物20240706--国内建系，耐药株等都是国内目前做的比较不稳定实验（冻存复苏是建系成功关键步骤，细工对难点痛点一些参考建议
原代建系更新参考组织-细胞痛点讨论-细工生物20240826---难点痛点细工方案参考
细胞规模培养生产，工程用配套产品出口咨询-细工方案20240815 ---含血清，细胞工厂兽用疫苗方案，延展后面类器官，人造肉，自动化培养，细胞培养方面都会用到
工业细胞生产辅助试剂应用-案例讨论-细工生物20240713
二倍体3T3,MRC5,WI38正常成纤维类几点痛点
细胞生产后蛋白保护试剂统计
原代细胞自动化培养优化讨论可行性-化学成分对细胞长期影响讨论技术数据统计（离体技术方法统计）

自动化培养转染细胞精准SOP,培养建系会容易很多，配套血替产品有以下资源，并有兴趣可讨论，我们负责全部技术层面开发，（类器官，鸡胚液已有相关产品应用了）后期建系合作胚胎类血清替代品建系合作，（鱼、鸡、猪、羊，鼠）要有胚胎类大量生产资源，研发可讨论，一种是国内该类应用备份，建系（科研先行，生产应用跟进种子库建立。
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自动化配套转染冗余特点，毒性低，转染效率不减（定制转染试剂），细胞状态佳，生长控制，维持培养有些现成技术储备。