精品推荐 | 从RNA到cDNA-翌圣5分钟反转录系列产品快速出圈!-技术前沿-资讯-生物在线

精品推荐 | 从RNA到cDNA-翌圣5分钟反转录系列产品快速出圈!

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2023-12-22T00:00 (访问量:32175)

 

反转录是将RNA转录成互补DNA (cDNA) 的过程,该反应由反转录酶介导完成。在有退火引物的情况下,反转录酶首先与 RNA 模板结合。反转酶的RNA依赖性 DNA 聚合酶活性通过掺入反应混合物中的dNTP来合成cDNA,反应生成得到 cDNA:RNA 杂合链,此过程被称为第一链 cDNA 合成。

 

 

莫洛尼鼠白血病病毒 (M-MLV) 反转录酶是分子生物学实验流程中常见的反转录酶之一。为了获得更高的反转录效率、更好的热稳定性和更高的 cDNA 合成率,通常会对原始的反转录酶进行基因工程改造。目前市面上的反转录试剂所需要的反转录时间普遍从15分钟到30分钟不等,时间相对较长,当反应样本量较大时,整体花费时间量也会急剧上升。翌圣生物现有的5分钟反转录系列产品,在5分钟内即可完成反转录,省时高效。

 

 

 

精品推荐一   

5分钟一步消化&反转录预混液(Cat #11151ES)

 

产品特点

 

· 

一步完成:一步完成gDNA去除和反转录;

· 

快速反应:消化&反转仅需5分钟;

· 

高效合成:可保证100 pg RNA反转录;

· 

产物稳定:cDNA产物可长久稳定保存;

· 

 

性能展示

  反转录产量高  

 

 

图. 以人293T细胞RNA为模板,分别检测三种基因。品牌A、品牌B、品牌C均为一步gDNA去除&反转录试剂。测试结果显示,在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,11151ES反转录的产量均优于其他品牌,Ct值更小。

 

 

 

 

图. 以拟南芥RNA为模板,品牌A、品牌B、品牌C均为一步gDNA去除&反转录试剂。测试结果显示,在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,11151ES反转录的产量均优于其他品牌,Ct值更小。

 

 优异的灵敏度    

图. 以人293T细胞RNA为模板,扩增30%GC、50%GC、60%GC和70%GC的基因。分别投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的Total RNA进行反转录并进行荧光定量检测。结果显示,11151ES可满足100 pg-1 μg RNA的反转录。

 

 cDNA产物稳定性好  

 

图.以人293T细胞RNA为模板进行反转录,将获得的cDNA产物进行反复冻融,分别冻融10次、20次、30次。测试结果显示11151ES反转录得到的cDNA产物在30次反复冻融处理后,仍保持高度的稳定性,Ct值差异不大。

 

图. 以人293T细胞RNA为模板进行反转录,将获得的cDNA产物在-20℃、4℃、25℃和37℃的温度条件下放置7天。测试结果显示11151ES反转录得到的cDNA产物在不同温度下存储7天,仍保持高度的稳定性,Ct值差异不大。

 

 

客户用户体验

 

样本来源:人肝脏组织总RNA

 

样本来源:胃黏膜细胞RNA

 

样本来源:小鼠胰岛素瘤细胞RNA

 

 

精品推荐二   

5分钟快速反转录试剂盒(11149/11150ES)

 

 

 

产品特点

 

· 

快速反转:最快5分钟左右即可完成第一链cDNA合成;

· 

检出率高:10 pg-1 ug的RNA检出率;

· 

高效合成:合成效率媲美进口,最长可合成14kb大小的片段;

· 

适用广泛:可用于下游PCR或qPCR;

· 

示踪便利:示踪版包含无干扰、可视化蓝色示踪染料,提醒加样进度。

· 

性能展示

  快速反转录  

 

反转录时间

平均Ct值

5 min

21.693

10 min

21.589

15 min

21.604

20 min

21.746

25 min

21.756

30 min

21.691

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行反转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,不同反转录时间处理的Ct值差值在0.2之内。说明产品可在5分钟内完成反转录,反转效果和长时间反转效果持平。

 

 

灵敏度高,最低可至10 pg

  

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行反转录,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,RNA 投入量为10 pg-1 μg时,11149ES均可反转成功,保证定量结果。

 

 扩增性能好,最长扩增14 kb片段  

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES进行反转录,将得到的cDNA进行PCR检测。结果显示,11149ES能够满足合成1 kb-14 kb长度的cDNA, 后续PCR有一定的适用场景。若需要直接反转出10kb以上的片段,建议延长反转录时间至20-30分钟,以保证最终片段的获取。

 

 反转录效率比对  

 

 

RNA投入量

Ct值

11149ES

进口A品牌

1 μg

15.2

15.5

100 ng

18.0

18.5

10 ng

21

21.7

1 ng

24.5

25.1

100 pg

29.1

29.7

10 pg

32.7

34.3

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES、进口A品牌进行反转录,其中11149ES不进行gDNA去除步骤,将得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,进口A品牌反转时间为13分钟, 11149ES反转时间为5分钟,不同产物定量显示,11149ES的Ct更小或者接近进口竞品,说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口A品牌的反转录效率。

 

 

RNA投入量

Ct值

11149ES

进口B品牌

1 μg

16.2

17.4

100 ng

19.0

20.5

10 ng

22

23.8

1 ng

26

27.9

100 pg

31.4

33.2

10 pg

32.9

35.6

 

图. 以293T细胞总RNA为模板,使用11149ES、进口B品牌进行逆转录,其中11149ES不进行gDNA去除步骤,得到的cDNA 进行qPCR 定量分析。结果显示,进口B品牌反转时间为20分钟,11149ES反转时间为5分钟,不同量底物定量显示,11149ES的Ct更小或者接近进口B品牌,说明11149ES 5分钟反转效率优于或近似进口B品牌的反转录效率。

 

 

客户体验反馈

 

 

样本来源:菊花叶片

客户评价:与某进口品牌效果相似,扩增常规大小的片段效果不错。

 

 

样本来源:果*叶片

客户评价:蓝色很好看。

 

 

样本来源:水稻

客户评价:与其他反转录试剂盒相比,节省加样时间,节省反转录反应时间(其他试剂盒需要15+2 min,本试剂盒只需5 min),后续基因克隆DNA电泳结果证明,本试剂盒反转效率更高,条带更亮,所以会更节省PCR使用试剂,节省成本。

 

相关产品推荐   

方法

分类

产品名称

货号

RNA提取

同Trizol提取

TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent

10606ES

免氯仿升级版

TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent(Tcm Free)

19202ES

动物组织/细胞总RNA提取,避开有毒试剂,最快15 min完成

MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit细胞/组织总RNA提取试剂盒

19221ES

qPCR染料法

高灵敏通用型定量预混液(染料法)

Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix

11184ES

超高性价比定量预混液 (染料法),已发文章累计IF达到5000+

Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox)

11201ES

Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox)

11202ES

Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox)

11203ES

反转录试剂

5 分钟一步消化&反转录预混液

Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR

11151ES

5 分钟快速反转,最长可满足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游应用PCR/qPCR)-示踪版

Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit

11149ES

5 分钟快速反转,最长可满足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游应用PCR/qPCR)-常规版

Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit(No Dye)

11150ES

高质量第一链cDNA合成预混液,含gDNA去除(下游应用qPCR)

Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)

11141ES

 

翌圣生物科技(上海)股份有限公司 商家主页

地 址: 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元

联系人: 李自转

电 话: 400-6111-883、021-34615995-8075

传 真: 021-34615995-188

Email:lizizhuan@yeasen.com

相关咨询
ADVERTISEMENT