免疫荧光鉴定步骤-技术前沿-资讯-生物在线

免疫荧光鉴定步骤

作者:上海雅吉生物科技有限公司 2021-06-18T09:54 (访问量:11455)

为了更好的帮助客户提供真实的原代细胞,使用免疫荧光鉴定出提取的细胞类型,免疫荧光技术又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。该技术的主要特点是:特异性强、敏感性高、速度快。 一下是赛百慷技术人员提供的免疫荧光细胞鉴定的步骤,仅做参考:

1.细胞爬片

取4片玻璃片于24孔板中,每孔加入培养基1mL,加入细胞0.02million个/孔。置培养箱2h或过夜。
2.固定
细胞爬片后,吸出培养基,用PBS洗一遍,加入4% PFA于4℃固定30min。用PBS洗3×5min/次。也可最后一次不吸出PBS,放4℃过夜。
3.破膜封闭
将玻片除去水分,置于培养皿支撑物上,
玻璃片封闭液配置:0.5% Trition X-100与PBS 1:1混合,再加10% 血清,
取50uL破膜封闭液滴于防水膜上,将玻片上有细胞的一面盖上2h。
4.一抗孵育
一抗配置:抗体与PBS 1:100(200)稀释
破膜后,取50uL一抗于防水膜上(湿盒中),将玻片有细胞的一面盖上置于4℃(最多可放置一周)
阴性对照组可用PBS代替一抗。
5.二抗孵育
PBS洗3×5min/次,
二抗混合液配置:二抗:PBS=1:500
DAPI:PBS=1:1000
防水膜上滴50uL二抗混合液,盖上玻片,避光,室温放置2h。
6.包埋

PBS洗3×5min/次,玻片上各滴1滴Fluoromount-G,将有细胞的一面盖上。

上海雅吉生物科技有限公司 商家主页

地 址: 上海市闵行区元江路5500号第1幢5658室

联系人: 王源

电 话: 15301693058

传 真: 021-34661275

Email:yajikit@163.com

相关咨询

人原代附睾管上皮细胞 (2021-07-08T14:16 浏览数:9705)

雅吉生物热烈庆祝中国建党100周年 (2021-07-02T09:17 浏览数:5325)

15P-1 (小鼠睾丸上皮细胞) (STR鉴定正确) (2021-06-23T09:59 浏览数:7826)

客户细胞培养过程中常见的问题说明 (2021-06-18T09:54 浏览数:9959)

免疫荧光鉴定步骤 (2021-06-18T09:54 浏览数:11455)

人真皮成纤维细胞的分离培养制备方式 (2021-06-17T09:04 浏览数:8003)

原代角质形成细胞的分离培养方法 (2021-06-17T09:03 浏览数:11610)

钻石探头量子显微镜可以探索纳米微观世界的奥秘 (2021-06-16T09:24 浏览数:8613)

过氧化物酶体活化受体可以加剧肿瘤形成 (2021-06-16T09:23 浏览数:8582)

式细胞术数据分析之——圈门技巧 (2021-06-15T10:11 浏览数:8955)

ADVERTISEMENT